Virus nohy a ústní choroby-o protilátka ELISA

Specifikace

FMDV-O AB ELISA

Zamýšlené použití: Virus hovězí nohy a onemocnění úst-o

Detekční sada protilátky ELISA je pro stanovení protilátky nohou a úst v bovinním séru in vitro. Test se používá k posouzení stavu protilátky pro virus onemocnění nohou a úst.

Vzorek: sérum

Požadované materiály, ale nejsou poskytnuty:

Čištěná voda

Pipettor

96- No čtečka mikrodestiček (450nm)

Časovač

Centrifuge (4000 ot / min)

Pračka

Trouba (37 stupňů)

Zkušební postupy a interpretace

Krok 1 Zkušební postup

1.1 Příprava řešení pro mytí

WOrkingová koncentrace wAshing Liquid:Před použitím by měl být roztok pro mytí obnoven na pokojovou teplotu (20-25 stupeň) a rovnoměrně se otřesen, aby byl jednotný. Poté zředí 20krát více koncentrovaného promývacího roztoku purifikovanou vodou (například 5 ml koncentrovaného promývacího roztoku je přidán do 95 ml purifikované vody), dobře promíchejte a zředěná promývací kapalina může být uložena 2-8 stupně po dobu 7 dnů.

1.2 Příprava vzorku

① Byla odebrána celá krev zvířat, odstředěna při 4000 ot / min po dobu 10 minut a byl odebrán supernatant. Sérum může být také přirozeně koagulováno bez hemolýzy.

② Zřeňte vzorek séra 1:25 (přidejte vzorek 5UL séra do vzorku 120Ul vzorku) a důkladně promíchejte.

Poznámka: Negativní a pozitivní kontroly je třeba také zředit.

1.3 Příprava konjugátu enzymu

Zřeďte enzymový konjugát 1:90 (přidejte 5UL enzymový konjugát (x100) na 445Ul vzorek vzorku) a důkladně promíchejte.

1.4 Zkušební postup

① Zdůrazněte mikrodestibu enzymu (podle počtu vzorků, lze několikrát rozebrat a použít), přidejte 100Ul zředěného séra do mikrodestičky enzymu, nastavte dvě studny pro negativní a pozitivní vzorky a přidejte 100Ul pro negativní a pozitivní kontroly na reakci dobře. Jemně protřepejte vzorek ve studni a pomocí filmu těsnicí desky zakryjte desku a inkubujte 37 stupňů po dobu 30 minut.

② Otevřete film těsnicí desky, otřepejte roztok v desce, přidejte do každé jamky 300 ul tekutiny pro mytí pracovní koncentrace a poté kapalinu zlikvidujte do studny. Výše uvedené kroky opakujte 5krát a nakonec poklepejte na čistý absorpční papír.

③ Add 100 ul enzymu konjugát s každou jamkou, zakryjte desku a inkubujte při 37 stupňů po dobu 45 minut.

④ Otevřete film těsnicí desky, otřepejte roztok v desce, přidejte do každé jamky 300 ul tekutiny pro mytí pracovní koncentrace a poté kapalinu zlikvidujte do studny. Výše uvedené kroky opakujte 5krát a nakonec poklepejte na čistý absorpční papír.

⑤ Add 100 ul roztoku substrátu pro každou jamku, zakryjte desku a inkubujte po dobu 10 minut po 37 stupňů od světla.

⑥dd 50 ul Stop roztok každé jamky a určete výsledek do 5 minut.

Krok 2 Interpretace výsledků

Hodnota OD450 každé jamky byla přečtena na 96- dobře mikrodeplate.

2.1 Validace

Průměrná hodnota OD450nm negativní kontroly byla<0.15 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Metoda výpočtu

Pro každý vzorek vypočítejte S/P následovně pomocí korigovaných hodnot vzorku a kontroly:

2.3 Interpretace výsledků

Když S/P.<0.15, it is judged as negative.

Když je S/P větší nebo roven 0. 25, je považován za pozitivní.

Když 0. 15 Méně nebo rovné s/p<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

Populární Tagy: Sada Virus Foot and Mouth Neasion Virus-O A protilátky ELISA, Čína Virus Foot and Mouth Coyone A protilátka ELISA, dodavatelé, výrobci, továrna